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| 产品编号 | 产品名称 |
| 大肠杆菌Nissle1917 的T7RNA 优化 高产 香豆酸 |
在大肠杆菌EcN中对T7RNAP进行优化以生产对香豆酸（p-Coumaric Acid, pCA，人体健康必需的生物活性化合物之一）。
该研究首先揭示了lac操纵子如何影响T7RNAP，对不同菌株的Lac操纵子进行了生物信息学分析，发现在EcN中存在一个LacI的弱启动子；X-gal检测显示LacZ在EcN中高表达。然后在两个T7衍生的EcN中，分别在lambda和HK022位点整合来自BL21（DE3）的基因盒（包括lac UV5启动子、lacO、一个截断的lacZ）和T7RNAP，命名为ET7L和ET7H。
通过研究乳糖浓度的影响以选择最佳的ET7菌株。随后通过探讨不同组合的复制来源、分子伴侣GroELS、诱导剂和培养基以微调具有酪氨酸氨解酶（TAL，将L-酪氨酸转化为pCA）的菌株来生产pCA。
将不同复制来源（ori）的两个骨架，中拷贝数pBR322（表示为P）和高拷贝数RSF（表示为R）与RtTAL基因（Rt）组装并转化至ET7L或ET7H（表示为L和H），作为PRtL，RRtL，PRtH和RRtH的四种组合在模拟肠道环境中进行进一步测试。最后，在最佳条件下，使用RRtL（质粒形式）获得了78.8%的最高pCA转化率；在ET7L中的HK022处整合T7-RtTAL于模拟的肠道环境中获得了51.5%的转化率。
综上，本研究对EcN的T7表达系统进行优化，加速了其成为活体细菌疗法有效的细胞工厂。
参考文献：《ACS Synthetic Biology》，Reprogramming T7RNA Polymerase in Escherichia coli Nissle 1917 under Specific Lac Operon for Efficient p-Coumaric Acid Production”
文献链接：https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/36087056/
编号：54643153464444 备案号：浙ICP备11028186号-1