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工程菌菌株

嗜水气单胞菌ATCC 7966 luxS基因敲除工程菌株

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嗜水气单胞菌ATCC 7966 luxS基因敲除工程菌株

产品介绍

研究群体感应信号分子AI-2合成酶编码基因luxS对嗜水气单胞菌ATCC 7966生理特性及毒力因子的影响.方法 利用同源重组原理,构建含有中间为卡那霉素抗性基因,两侧为luxS基因上,下游同源序列片段的基因敲除质粒,将构建好的质粒转化大肠埃希氏菌SM 10(λpir)感受态细胞,利用接合法将质粒转入嗜水气单胞菌ATCC 7966,通过抗性筛选,PCR和DNA测序确认嗜水气单胞菌luxS基因缺失突变株.比较野生株ATCC 7966和luxS基因缺失突变株生长速度,AI-2合成,胞外蛋白酶合成及生物膜形成的差异.

结果 嗜水气单胞菌luxS基因缺失突变株△luxS构建成功.与野生株相比,突变株生长周期延长,基本丧失合成AI-2和胞外蛋白酶的能力;突变株生物膜形成能力降低,生长24 h时生物膜形成能力为野生株的14.5%,36 h时生物膜形成能力为野生株的60.0%,突变株生物膜形成速度明显比野生株缓慢,结构更为疏松.

结论 luxS基因参与调控嗜水气单胞菌的生长,AI-2合成和毒力因子表达,本研究为进一步研究luxS基因在嗜水气单胞菌致病性中发挥的作用奠定基础.

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