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| 产品编号 | 产品名称 |
| 大肠杆菌Nissle 1917（EcN）的T7启动子表达系统ET7L和ET7H |
Lac操纵子在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中是控制T7RNA聚合酶（T7RNAP）和T7启动子正交的标准调节器，用于蛋白质的表达。然而，大肠杆菌Nissle 1917（EcN）这一独特的益生菌菌株少有精确适应T7系统的。
在大肠杆菌Nissle 1917（EcN）的lambda和HK022位点整合来自BL21（DE3）的基因盒（包括lac UV5启动子、lacO、一个截断的lacZ）和T7RNAP，命名为ET7L和ET7H，研究乳糖浓度的影响以选择最佳的ET7菌株。随后通过探讨不同组合的复制来源、分子伴侣GroELS、诱导剂和培养基以微调具有酪氨酸氨解酶（TAL，将L-酪氨酸转化为pCA）的菌株来生产pCA。将不同复制来源（ori）的两个骨架，中拷贝数pBR322（表示为P）和高拷贝数RSF（表示为R）与RtTAL基因（Rt）组装并转化至ET7L或ET7H（表示为L和H），作为PRtL，RRtL，PRtH和RRtH的四种组合在模拟肠道环境中进行进一步测试。最后，在最佳条件下，使用RRtL（质粒形式）获得了78.8%的最高pCA转化率；在ET7L中的HK022处整合T7-RtTAL于模拟的肠道环境中获得了51.5%的转化率。
综上，本研究对EcN的T7表达系统进行优化，加速了其成为活体细菌疗法有效的细胞工厂。
参考文献：
Reprogramming T7RNA Polymerase in Escherichia coli Nissle 1917 under Specific Lac Operon for Efficient p-Coumaric Acid Production
编号：54643153464444 备案号：浙ICP备11028186号-1