大肠杆菌载体 E.coli Vector 大肠杆菌宿主菌株 E.coli 细菌广宿主载体 bacateria broad range host vector 链霉菌载体及菌株 Streptomyces 芽孢杆菌载体 Bacillus vector 芽孢杆菌宿主菌株 乳酸菌载体 lactic acid bacteria vector 乳酸菌宿主菌株 lactic acid bacteria strain 细菌基因敲除载体 毕赤酵母载体 毕赤酵母宿主菌株 酿酒酵母载体 酿酒酵母宿主菌株 丝状真菌载体 mold/fungi vector 乳酸克鲁维酵母载体 酵母真菌基因敲除基因编辑载体 植物细胞载体 plant cell vector 农杆菌菌株Agrobacterium tumefaciens strain 植物细胞基因敲除载体 plant cell 哺乳动物细胞载体 哺乳动物细胞荧光载体 荧光素酶报告基因载体 哺乳动物细胞基因敲除基因编辑载体 杂交系统 慢病毒载体 腺病毒载体 逆转录病毒载体 杆状病毒表达载体 基因干扰 RNAi载体 基因/cDNA/ORF 转座子质粒系统 transposon 金黄色葡萄球菌载体 staphylococcus aureus 假单胞菌载体 噬菌体 phage 不动杆菌载体 双岐杆菌载体 藻类表达载体 链球菌载体 厌氧菌载体 基因治疗载体 大肠杆菌基因突变体菌株 细菌荧光质粒 白色念珠菌载体 体外转录载体 谷氨酸棒杆菌载体 酿酒酵母基因突变体菌株 线虫载体 斑马鱼载体 Zebra fish 果蝇,昆虫载体Drosophila 鱼类细胞载体 fish cell 分支杆菌载体 克雷伯菌 枯草芽孢杆菌基因缺失突变株
产品编号 | 产品名称 |
基因改造酿酒酵母底盘菌B184M分泌表达胶原酶 |
将从组织溶梭状芽胞菌种获得的I型II型胶原酶基因colG和colH密码子优化后通过质粒转入蛋白分泌优化酿酒酵母底盘菌B184M中。使用添加终浓度10 mM氯化钙和0.6 mM氯化锌的YPD培养基发酵后对底物FALGPA(N-[3-(2-furyl) acryloyl]-Leu-Gly-Pro-Ala)表现出了较高酶活。为进一步提升酶活,作者对信号肽及启动子进行了优化,最终选择了TPI1p启动子并采用α因子信号肽-colG前导肽-colG这一结构进行表达获得了最高产量。随后作者通过对比重组菌株BG02(表达colG)和BH01(表达colH)的生长曲线发现两个蛋白主要分泌阶段处于生长过程中的不同时期,colG在较早时期就达到很高水平,而colH则分泌滞后,并推断增加NADPH水平可增产蛋白。