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CRISPR基因编辑

产低毒性脂多糖大肠杆菌 基因重组株的构建

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产低毒性脂多糖大肠杆菌 基因重组株的构建

产品介绍

细菌脂多糖( LPS) 对宿主细胞具有一定的毒性,但经修饰后的单磷酸类脂 A( MPLA) 却是一种无毒性的高 效免疫佐剂。选择天然 O 抗原不完全的大肠杆菌 J5 疫苗株为出发菌株,利用 λ - Red 同源重组技术导入外源弗朗西 斯菌( Francisella novicida) lpxE 基因,缺失大肠杆菌 lpxM 基因。

结果显示,J5ΔlacI: : lpxEΔlpxM 基因重组株的 LPS 鲎试 剂活性较 DH5α 和 J5 原菌显著降低; 对 4 周龄的 ICR 小鼠腹腔注射 LPS 提取物,重组菌和 PBS 组的小鼠体征及肝脏 切片均正常。同时,腹腔注射大肠杆菌 J5 和 DH5α 的小鼠被毛凌乱、精神抑郁、肝脏细胞肿大,发生炎性浸润,有明显 的毒性反应。以上结果说明,J5 重组菌的 LPS 已经区别于原菌,是低毒性的 MPLA 产物。上述重组株的成功构建,能 为生产廉价的兽用 MPLA 免疫佐剂奠定工作基础。

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