大肠杆菌载体 E.coli Vector 大肠杆菌宿主菌株 E.coli 细菌广宿主载体 bacateria broad range host vector 链霉菌载体及菌株 Streptomyces 芽孢杆菌载体 Bacillus vector 芽孢杆菌宿主菌株 乳酸菌载体 lactic acid bacteria vector 乳酸菌宿主菌株 lactic acid bacteria strain 细菌基因敲除载体 毕赤酵母载体 毕赤酵母宿主菌株 酿酒酵母载体 酿酒酵母宿主菌株 丝状真菌载体 mold/fungi vector 乳酸克鲁维酵母载体 酵母真菌基因敲除基因编辑载体 植物细胞载体 plant cell vector 农杆菌菌株Agrobacterium tumefaciens strain 植物细胞基因敲除载体 plant cell 哺乳动物细胞载体 哺乳动物细胞荧光载体 荧光素酶报告基因载体 哺乳动物细胞基因敲除基因编辑载体 杂交系统 慢病毒载体 腺病毒载体 逆转录病毒载体 杆状病毒表达载体 基因干扰 RNAi载体 基因/cDNA/ORF 转座子质粒系统 transposon 金黄色葡萄球菌载体 staphylococcus aureus 假单胞菌载体 噬菌体 phage 不动杆菌载体 双岐杆菌载体 藻类表达载体 链球菌载体 厌氧菌载体 基因治疗载体 大肠杆菌基因突变体菌株 细菌荧光质粒 白色念珠菌载体 体外转录载体 谷氨酸棒杆菌载体 酿酒酵母基因突变体菌株 线虫载体 斑马鱼载体 Zebra fish 果蝇,昆虫载体Drosophila 鱼类细胞载体 fish cell 分支杆菌载体 克雷伯菌 枯草芽孢杆菌基因缺失突变株
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产低毒性脂多糖大肠杆菌 基因重组株的构建 |
细菌脂多糖( LPS) 对宿主细胞具有一定的毒性,但经修饰后的单磷酸类脂 A( MPLA) 却是一种无毒性的高 效免疫佐剂。选择天然 O 抗原不完全的大肠杆菌 J5 疫苗株为出发菌株,利用 λ - Red 同源重组技术导入外源弗朗西 斯菌( Francisella novicida) lpxE 基因,缺失大肠杆菌 lpxM 基因。
结果显示,J5ΔlacI: : lpxEΔlpxM 基因重组株的 LPS 鲎试 剂活性较 DH5α 和 J5 原菌显著降低; 对 4 周龄的 ICR 小鼠腹腔注射 LPS 提取物,重组菌和 PBS 组的小鼠体征及肝脏 切片均正常。同时,腹腔注射大肠杆菌 J5 和 DH5α 的小鼠被毛凌乱、精神抑郁、肝脏细胞肿大,发生炎性浸润,有明显 的毒性反应。以上结果说明,J5 重组菌的 LPS 已经区别于原菌,是低毒性的 MPLA 产物。上述重组株的成功构建,能 为生产廉价的兽用 MPLA 免疫佐剂奠定工作基础。