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产品编号 | 产品名称 |
解脂酵母基因工程菌,高产玉米黄质 |
在解脂耶氏酵母中,乙酰辅酶A经甲羟戊酸(Mevalonic acid,MVA)途径生成MVA,再经一系列反应生成香叶基香叶基焦磷酸 ( Geranylgeranyl pyrophosphate ,GGPP )。作者首先通过引入八氢番茄红素脱氢酶 (carB) 和双功能八氢番茄红素合酶/番茄红素环化酶 (carRP)催化GGPP生成β-胡萝卜素,产量仅19.9 mg/L。接下来对β-胡萝卜素合成途径中的关键酶进行突变和模块化组装提升β-胡萝卜素至422.0 mg/L。又通过引入异源的甲羟戊酸合成酶基因mvaE和mvaSMT增强了MVA的供应,进一步增加β-胡萝卜素产量至536.8 mg/L。然后引入β-胡萝卜素羟化酶基因crtZ,得到玉米黄质产量为326.5 mg/L,这个过程需要辅因子如NADPH和铁氧还蛋白(ferredoxin,Fd)的参与,因此引入来源于拟南芥根的氧化还原酶RFNR1以产生更多的还原型Fd。RFNR1将氢从NADPH转到氧化型Fd上生成还原型Fd,还原型Fd被CrtZ利用由β-胡萝卜素合成玉米黄质,同时产生氧化型Fd。RFNR1与CrtZ形成了一个Fd辅因子再生循环。最后通过增加crtZ拷贝数加强玉米黄质合成途径,使得玉米黄质产量在摇瓶中达到775.3 mg/L,为目前报道最高。
参考文献:
“Metabolic Engineering of Yarrowia lipolytica for Zeaxanthin Production”
文献链接:
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37676277/