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CRISPR基因编辑

高产聚唾液酸重组大肠杆菌工程菌构建

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高产聚唾液酸重组大肠杆菌工程菌构建

产品介绍

唾液酸是一类含有 9 个碳原子并具有吡喃糖结构的酸性氨基糖,又称神经氨酸;唾液酸在自然界中分布广泛,且种类繁多,迄今已发现超过 60 种唾液酸。N-乙酰神经氨酸  (Neu5Ac)  是最重要的一种唾液酸,是其他唾液酸合成的前体物质,与人类的健康关系最为密切;
Neu5Ac 可以用于合成抗病毒药物,治疗 H1N1 和 H5N1 流感等疾病。此外,Neu5Ac 也有很大的营养价值,它能促进婴儿的大脑发育,同时对维持早产儿脑功能和健康也有积极作用。目前制备和生产 Neu5Ac 常用的方法是酶催化法,该方法产量
虽高,但需要添加过量的丙酮酸导致原料浪费、产品纯化困难以及环境压力增大。建立一个不依赖丙酮酸的 Neu5Ac 合成方法:以 N-乙酰葡萄糖胺  (Glc NAc)  为底物,在 N-乙酰葡萄糖胺异构酶 (AGE)  的催化下异构化为 N-乙酰甘露糖胺  (Man NAc);然后,在 Neu5Ac 合成酶  (Neu B)  的催化下,与磷酸烯醇式丙酮酸  (PEP)  发生不可逆反应合成 Neu5Ac。在大肠杆菌中构建上述 
Neu5Ac 合成途径,并利用代谢工程和发酵工程方法强化 Neu5Ac 的合成。

最终优化体系,在发酵罐中 65  h 合成Neu5Ac 达到 16.02 gL-1

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