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分选酶( sortase) 普遍存在于革兰氏阳性细菌中，是一类膜结合的转肽酶，负责将表面蛋白共价结合到细胞壁的 肽聚糖上。

自噬菌体表面展示技术建立以来，人们又相 继开发了细菌、真菌等多种表面展示系统，如大 肠杆菌等革兰氏阴性细菌、葡萄球菌等革兰氏阳 性细菌和酵母等真菌的表面展示系统。表面展示 系统可应用于疫苗开发、蛋白质及多肽文库筛选、 生物传感器研制、全细胞生物催化剂、生物吸附剂 等领域和临床诊断以及污染环境的生物修复等， 而且新的应用途径仍在不断的扩展中［2，3］。目前 革兰氏阳性菌的表面展示系统多是由分选酶介导 的，外源蛋白与分选酶底物融合表达，通过分选酶 的转 肽 作 用 共 价 结 合 于 细 胞 壁 肽 聚 糖 上。 Schneewind 等［1］将大肠杆菌的磷酸酯酶插入到 protein A 的信号肽和分选信号之间进行融合表 达，首次在葡萄糖球菌中进行了表面展示。利用 来自金 黄 色 葡 萄 糖 球 菌 分 选 酶 底 物 protein A ( SpA) 的启动子、信号肽和分选信号以及 S． hyicus 的脂肪酶的启动子、信号肽和 SpA 的分选信 号，在革兰氏阳性细菌木糖葡萄球菌和山羊葡萄 球菌中成功地展示了具有二价金属离子结合活性 的聚组氨酸多肽，重组的葡萄糖球菌显示出一定 Ni 2 + 和 Cd2 + 离子 结 合 活 性［3，4］。Nguyen 和 Schumann ［2］将 Listeria monocytogenes 中识别分选 信号 LPXTG 的 SrtA 分选酶编码基因转入枯草芽 孢杆菌，然后将 α-淀粉酶基因与金黄色葡萄球菌 的 fibronectin binding protein B( FnBPB) 的 C 端分 选信号编码区融合，一并转入枯草芽孢杆菌，在每 个枯草芽孢杆菌细胞表面展示了高达 240 000 分 子的 α-淀粉酶。此外，利用分选酶介导的表面展 示系统，在多种革兰氏阳性菌细胞表面成功展示 了纤维素结合域、内酰胺酶、酯酶、金属结合肽和 抗原、抗体等［3，4，5］。与其他展示系统相比，革兰 氏阳性菌表面展示系统具有以下优点: 表面蛋白 只需跨越细胞质膜，外源蛋白更易展示; 可允许多 达几百个氨基酸的外源蛋白插入，而革兰氏阴性 细菌表面展示系统的通常只能插入较短的片段; 革兰氏阳性菌细胞壁更厚，坚固且易于操作等。

[1] Schneewind O，Model P，Fischetti V A． Sorting of protein A to the staphylococcal cell wall［J］． Cell，1992，70，267 － 281．

[2]Samuelson P，Wernerus H，Svedberg M，et al． ． Staphylococcal surface display of metal-binding polyhistidyl peptides ［J］． Appl． Environ． Microbiol． ，2000，66: 1243 － 1248．

[3]Wernerus H，Lehtio J，Samuelson P，et al． ． Engineering of staphylococcal surfaces for biotechnological applications［J］． J． Biotechnol． ，2002，96: 67 － 78

[4]Nguyen H D，Schumann W． Establishment of an experimental system allowing immobilization of proteins on the surface of Bacillus subtilis cells［J］． J． Biotechnol． ，2006，122: 473 － 482

[5] Lehtio J，Wernerus H，Samuelson P，et al． ． Directed immobiization of recombinant Staphylococci on cotton fibers by functional display of a fungal cellulose-binding domain［J］． FEMS Microbiol． Lett． ，2001，195: 197 － 204．

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