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| 产品编号 | 产品名称 |
| pCold GST 冷激启动子质粒，带gst促溶标签 |
| 出品公司: | TAKARA |
|---|---|
| 载体名称: | pCold-GST |
| 质粒类型: | 大肠杆菌表达载体 |
| 高拷贝/低拷贝: | 低拷贝 |
| 克隆方法: | 限制性内切酶；多克隆位点 |
| 启动子: | cspA |
| 载体大小: | 5097 bp |
| 5' 测序引物及序列: | pCold Forward: 5′-ACGCCATATCGCCGAAAGG-3′ |
| 3' 测序引物及序列: | pCold Reverse 5′-GGCAGGGATCTTAGATTCTG-3′ |
| 载体标签: | GST Tag（N-端）, HRV 3C蛋白酶切位点（N-端）,His Tag（N-端） |
| 载体抗性: | 氨苄青霉素（Ampicillin） |
| 克隆菌株: | DH5alpha等 |
| 表达菌株: | 任意E.coli菌株 |
| 备注: | pCold-GST载体表达GST融合蛋白，GST标签可以提高目的蛋白的可溶性，提高目的蛋白的纯度。 |
| 产品目录号: | #3372 |
| 稳定性: | 稳表达 |
| 组成型/诱导型: | 诱导型（IPTG) |
| 病毒/非病毒: | 非病毒 |
pCold GST DNA在冷休克载体的基础上，整合了来源于Schistosoma japonicum的谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferases, GST)可溶性标签。通过GST在目的蛋白质N末端的融合表达，可提高融合蛋白质的稳定性和可溶性。
本制品在cspA启动子的下游插入了5’非编码区（5’-UTR）、翻译增强元件（TEE）、His标签、GST标签和多克隆位点（MCS）（下图）。此外，在cspA启动子下游还插入了可以严格调控目的基因表达的lac operator。
GST标签融合蛋白质可进行高亲和性纯化。在GST标签和多克隆位点（MCS）之间插入了高特异性HRV 3C Protease 的识别序列，可从融合蛋白质中去除标签。HRV 3C Protease的最适温度为4～5℃，可以在温和的条件下进行目的蛋白质的标签去除反应。
pCold 系列载体的启动子是大肠杆菌来源的，所以大部分大肠杆菌都可以作为表达宿主使用。
编号：54643153464444 备案号：浙ICP备11028186号-1