生产硫酸软骨素的重组毕赤酵母

质粒/菌株

质粒改造
质粒抗性改造组成型/诱导型荧光质粒质粒复制起点更换质粒启动子替换合成生物学质粒构建
现货质粒菌株
大肠杆菌载体 E.coli Vector 大肠杆菌宿主菌株 E.coli 细菌广宿主载体 bacateria broad range host vector 链霉菌载体及菌株 Streptomyces 芽孢杆菌载体 Bacillus vector 芽孢杆菌宿主菌株乳酸菌载体 lactic acid bacteria vector 乳酸菌宿主菌株 lactic acid bacteria strain 细菌基因敲除载体毕赤酵母载体毕赤酵母宿主菌株酿酒酵母载体酿酒酵母宿主菌株丝状真菌载体 mold/fungi vector 乳酸克鲁维酵母载体酵母真菌基因敲除基因编辑载体植物细胞载体 plant cell vector 农杆菌菌株Agrobacterium tumefaciens strain 植物细胞基因敲除载体 plant cell 哺乳动物细胞载体哺乳动物细胞荧光载体荧光素酶报告基因载体哺乳动物细胞基因敲除基因编辑载体杂交系统慢病毒载体腺病毒载体逆转录病毒载体杆状病毒表达载体基因干扰 RNAi载体基因/cDNA/ORF 转座子质粒系统 transposon 金黄色葡萄球菌载体 staphylococcus aureus 假单胞菌载体噬菌体 phage 不动杆菌载体双岐杆菌载体藻类表达载体链球菌载体厌氧菌载体基因治疗载体大肠杆菌基因突变体菌株细菌荧光质粒白色念珠菌载体体外转录载体谷氨酸棒杆菌载体酿酒酵母基因突变体菌株线虫载体斑马鱼载体 Zebra fish 果蝇，昆虫载体Drosophila 鱼类细胞载体 fish cell 分支杆菌载体克雷伯菌枯草芽孢杆菌基因缺失突变株
工程菌菌株
质粒菌株资料

产品编号	产品名称
	生产硫酸软骨素的重组毕赤酵母

产品介绍

为了有效解决硫酸软骨素生产过程中的问题，作者通过工程化的毕赤酵母，利用廉价的甲醇从头合成 CS。首先，将来自大肠杆菌 K4 的 kfoC 和 kfoA，及来自枯草芽孢杆菌的 tuaD 三个外源基因引入毕赤酵母，构建软骨素合成途径，得到 5.5 mg/L 的软骨素合成菌株。进一步通过密码子及基因组合优化，软骨素的产量提高了约 35 倍，达到 189.8 mg/L。对 6 种 Kozak 序列和 10 种不同的内源启动子进行比较和分析，实现了软骨素-4-O-磺基转移酶的活性表达（41.3 U/L）。整合软骨素合成模块和磺酸化模块后，工程菌株 Pp006 成功合成了 182.0 mg/L CS [GlcA-GalNAc (4S)]，磺酸化度为 1.1%。通过过表达腺苷 5'-三磷酸硫酸化酶和腺苷 5'-磷酸硫酸激酶，强化了 3'-磷酸腺苷-5'-磷酸硫酸(PAPS)的供给，进一步将硫酸化度提高到 2.8%。在 3-L发酵罐分批补料培养中，CS 最高产量达到 2.1 g/L，硫酸化度提高到 4.0%。