基于自转运蛋白(AT)的大肠杆菌表面展示系统（可以拓展到其他革兰氏阴性细菌）

质粒/菌株

质粒改造
质粒抗性改造组成型/诱导型荧光质粒质粒复制起点更换质粒启动子替换合成生物学质粒构建
现货质粒菌株
大肠杆菌载体 E.coli Vector 大肠杆菌宿主菌株 E.coli 细菌广宿主载体 bacateria broad range host vector 链霉菌载体及菌株 Streptomyces 芽孢杆菌载体 Bacillus vector 芽孢杆菌宿主菌株乳酸菌载体 lactic acid bacteria vector 乳酸菌宿主菌株 lactic acid bacteria strain 细菌基因敲除载体毕赤酵母载体毕赤酵母宿主菌株酿酒酵母载体酿酒酵母宿主菌株丝状真菌载体 mold/fungi vector 乳酸克鲁维酵母载体酵母真菌基因敲除基因编辑载体植物细胞载体 plant cell vector 农杆菌菌株Agrobacterium tumefaciens strain 植物细胞基因敲除载体 plant cell 哺乳动物细胞载体哺乳动物细胞荧光载体荧光素酶报告基因载体哺乳动物细胞基因敲除基因编辑载体杂交系统慢病毒载体腺病毒载体逆转录病毒载体杆状病毒表达载体基因干扰 RNAi载体基因/cDNA/ORF 转座子质粒系统 transposon 金黄色葡萄球菌载体 staphylococcus aureus 假单胞菌载体噬菌体 phage 不动杆菌载体双岐杆菌载体藻类表达载体链球菌载体厌氧菌载体基因治疗载体大肠杆菌基因突变体菌株细菌荧光质粒白色念珠菌载体体外转录载体谷氨酸棒杆菌载体酿酒酵母基因突变体菌株线虫载体斑马鱼载体 Zebra fish 果蝇，昆虫载体Drosophila 鱼类细胞载体 fish cell 分支杆菌载体克雷伯菌枯草芽孢杆菌基因缺失突变株基因ORF 金黄色葡萄球菌基因敲除突变株肺炎克雷伯菌基因敲除突变株
工程菌菌株
质粒菌株资料

产品编号	产品名称
	基于自转运蛋白(AT)的大肠杆菌表面展示系统（可以拓展到其他革兰氏阴性细菌）

产品介绍

背景：自转运蛋白（AT）是革兰氏阴性菌中一种简单且高效的蛋白分泌系统，但此前因缺乏结构信息而难以被有效利用。
目标：利用Hbp的晶体结构，将其改造为能够分泌和表面展示异源蛋白（以结核分枝杆菌抗原ESAT6为例）的平台。
结构工程：基于Hbp结构，保留了其核心的β-螺旋结构（β-stem），替换了侧翼结构域。实验证明，完整的β-stem对于蛋白的稳定性至关重要。
功能实现：
分泌：构建的Hbp-ESAT6嵌合体能被大肠杆菌高效、稳定地分泌到培养基中。
展示：通过阻断切割位点，成功构建了细胞表面展示ESAT6的变体，并通过蛋白酶K实验和免疫电镜验证了其表面暴露。
通用性验证：该策略在另一种自转运蛋白（EspC）中也成功实现了ESAT6的分泌，表明该方法具有普适性。
应用前景
活疫苗开发：该平台在减毒鼠伤寒沙门氏菌中通过单拷贝基因整合实现了高效展示，展示了其在重组活疫苗开发中的巨大潜力。
生物技术应用：该平台可用于其他需要高水平分泌或展示重组蛋白的生物技术领域。
参考文献:

A structurally informed autotransporter platform for efficient heterologous protein secretion and display

http://www.microbialcellfactories.com/content/11/1/85