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大肠杆菌蔗糖为底物 全合成阿洛酮糖

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大肠杆菌蔗糖为底物 全合成阿洛酮糖

产品介绍

代谢工程改造大肠杆菌JM109 (DE3),利用双磷酸转移酶系统(PTS)依赖的运输机制,实现了从蔗糖到D-阿洛酮糖的高效转化。研究中,团队构建了不可逆的合成途径,共表达scrA、scrB、alsE和a6PP基因,通过双PTS依赖的运输增强蔗糖和D-果糖的底物利用效率。此外,通过引入果糖-1,6-二磷酸酶突变体(GlpX [K29A]),将果糖-1-磷酸导入合成途径,并通过敲除pfkA和rpiA基因,削弱了细胞内的糖酵解(EMP)和磷酸戊糖(PP)途径,进一步通过结构稳定的反义RNA(asRNA)抑制FbaA表达,调节碳通量。在优化发酵培养基后,通过5 L发酵罐的补料发酵,D-阿洛酮糖的产量达到了12.8 g/L,以蔗糖为底物的得率达到了0.23 g/g,相比之前的研究提高了14.3% 和10.0%。

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